SLP-HS Single Reagent Set Ⅱ
Quantitative Bestimmung von Peptidoglycan (PG) und (1->3)-β-D-Glucan (BDG) in parenteralen Lösungen und Arzneistoffen
Das SLP-HS Single Reagent Set II kann sowohl Peptidoglycan als auch (1->3)-β-D-Glucan nachweisen. Das Produkt basiert auf einem Selbstschutzmechanismus der Seidenraupe Bombyx mori, der bei einer mikrobiellen Kontamination zu einer Farbänderung durch Bildung eines schwarzen Melaninpigments, führt. Da PG in allen bakteriellen Zellwänden und BDG in den meisten Pilzen vorkommt, stellt das SLP-Reagenz (Seidenraupenlarvenplasma-Reagenz, engl. Silkworm Larvae Plasma reagent) eine hochempfindliche Methode zum Nachweis einer mikrobiellen Kontamination dar.
EIGENSCHAFTEN
- Testprinzip auf der Basis von Seidenraupenlarvenplasma (SLP-Reagenz)
- Kinetisch-kolorimetrischer Test
- Aus S. aureus isoliertes PG dient als Standard
- Nachweisgrenze: 1 pg/ml (BDG) / 10 pg/ml (PG)
- Probe: Jede Probe
- Automatisierte Analyse mittels Toxinometer®
- Messzeit: 120 Minuten bei 30 °C
| Katalognr. | Produktname | Anzahl |
| 296-81001 | SLP-HS Single Reagent Set II |
20 tests |
INHALT DES KITS
|
1 |
SLP-HS Reagent II (lyophilisiertes Reagenz mit Silkworm Larvae Plasma und DOPA) |
0.1 mL x 20 vials |
|
2 |
SLP-Verdünnungsmittel
|
5.0 mL x 2 vials
|
|
3 |
Standard (verdautes Peptidoglycan aus Staphyloccocus aureus)
|
0.5 mL x 1 vial
|
EINLEITUNG
Die Hämolymphe der Seidenraupe Bombyx mori verfügt über einen als „Prophenoloxidase-Kaskadensystem (Pro-PO)“ bezeichneten Selbstschutzmechanismus, der durch Peptidoglycan (PG) und (1->3)-β-D-Glucan (BDG) ausgelöst wird, was zur Aktivierung der Prophenoloxidase (PO) und zur Bildung toxischer Zwischenprodukte gegen eindringende Erreger führt.
Obwohl der genaue Mechanismus noch nicht vollständig geklärt ist, wird postuliert, dass verschiedene Serinproteasen an diesem Prozess beteiligt sind, der schließlich zur Spaltung des inaktiven Pro-PO in die aktive PO und zur Bildung von Melanin führt.
Das SLP-Reagenz ist ein lyophilisiertes Produkt, das unter sterilen Bedingungen aus der Hämolymphe der Seidenraupe hergestellt wird und alle am Pro-PO-Kaskadensystem beteiligten Faktoren enthält. Nach Aktivierung durch PG aus Bakterien und BDG aus Pilzen und Hefen erfolgt die Melanisierung über zwei Stufen, durch Oxidation von L-DOPA (L-3,4-Dihydroxyphenylalanin) in Dopachrom und anschließende Umwandlung von Dopachrom in ein schwarzes Melaninpigment, wodurch eine Farbänderung der Lösung hervorgerufen wird.
Da PG in allen bakteriellen Zellwänden und BDG in den meisten Pilzen vorkommt, stellt das SLP-Reagenz eine hochempfindliche Methode zum Nachweis einer mikrobiellen Kontamination dar.
Da PG in allen bakteriellen Zellwänden und BDG in den meisten Pilzen vorkommt, stellt das SLP-Reagenz eine hochempfindliche Methode zum Nachweis einer mikrobiellen Kontamination dar.
TESTPRINZIP
Das SLP-Reagenz reagiert stark mit PG und BDG und induziert so die Bildung eines schwarzen Melaninpigments, das sowohl durch einen visuellen Nachweis als auch durch eine quantitative Absorptionsmessung bei 650 nm festgestellt werden kann.
Für die quantitative Bestimmung kann die Analyse mit dem Toxinometer® ET-7000 durchgeführt werden.
Die Quantifizierung erfolgt durch die Verfolgung der Melaninbildung, bei der die Aktivierungszeit (Ta oder Onset-Zeit) der Reaktion, d. h. der Zeitpunkt, an dem die Absorption einen vorgegebenen Schwellenwert erreicht, gemessen wird. Durch die Korrelation des Messwerts mit einer zuvor erstellten Kalibrierkurve unter Verwendung eines PG-Standards kann die absolute PG- und BDG-Konzentration mit einer Empfindlichkeit im unteren pg/ml-Bereich bestimmt werden.
