Kit SLP-HS de Reagente Único II
Determinação quantitativa de peptidoglicano (PG) e (1->3)-β-D-glicano em soluções parentais e farmacêuticas ativas
O Kit SLP-HS de Reagente Único II é capaz de detectar ambos peptidoglicano (PG) e (1->3)-β-D-glicano (BDG). O produto utiliza um mecanismo de autodefesa de bicho-da-seda Bombyx mori que leva a uma mudança de cor através da construção de um pigmento de melanina preta na presença de contaminação microbiana. Uma vez que PG é encontrado em todas as paredes celulares bacterianas e BDG na maioria dos fungos, o reagente SLP (plasma de larvas de bicho-da-seda) constitui um método altamente sensível e de banda larga para detecção de contaminação microbiana
CARACTERÍSTICAS PRINCIPAIS
- Princípio de teste baseado em SLP (reagente de plasma de larvas de bicho-da-seda)
- Teste Colorimétrico Cinético
- PG isolado de S. aureus usado como padrão
- Limite de detecção: 1 pg/ml (BDG) / 10 pg/ml (PG)
- Amostra: qualquer amostr
- Análise automatizada através do software Toximaster®
- Tempo de medição: 120 minutos a 30 °C
|
N° de Catálogo |
Nome do Produto |
Quantidade |
| 296-81001 | SLP-HS Single Reagent Set II |
20 tests |
Conteúdo do Kit
|
1 |
Reagente SLP-HS II (reagente liofilizado contendo Plasma de Larvas de Bicho-da-seda e DOPA) |
0.1 mL x 20 vials |
|
2 |
Diluente SLP |
5.0 mL x 2 vials
|
|
3 |
Padrão (peptidoglicano digerido de Staphylococcus aureus) |
0.5 mL x 1 vial
|
INTRODUÇÃO
A hemolinfa de bicho-da-seda Bombyx mori contém um mecanismo de autodefesa referido como o "sistema de cascata da profenoloxidase (Pro-PO)", que é desencadeado por peptidoglicano (PG) e (1->3)-β-D-glicano (BDG), resultando na ativação da profenoloxidase (PO) e produção de intermediários tóxicos contra patógenos invasores.
Embora o mecanismo exato ainda não esteja totalmente elucidado, postula-se que diferentes serina proteases estão envolvidas nesse processo, eventualmente levando à clivagem da Pro-PO inativo para a PO ativa e formação de melanina.
O reagente SLP é um produto liofilizado preparado em condições estéreis a partir da hemolinfa do bicho-da-seda, contendo todos os fatores envolvidos no sistema de cascata Pro-PO. Após a ativação por PG de bactérias e BDG de fungos e leveduras, a melanização ocorre ao longo de duas etapas, através da oxidação de L-DOPA (L-3,4-Di-hidroxifenilalanina) em Dopacromo e subsequente conversão deste em pigmento de melanina preta, resultando assim em mudança de cor da solução.
Uma vez que o PG é encontrado em todas as paredes celulares bacterianas e BDG na maioria dos fungos, o reagente SLP constitui um método altamente sensível e de banda larga para detecção de contaminação microbiana.
PRINCÍPIO DO TESTE
O reagente SLP reage fortemente com PG e BDG, induzindo a formação de pigmento de melanina preta, que pode ser monitorado, seja por meio de detecção visual ou quantitativamente medindo a absorbância a 650 nm.
Para a última aplicação, a análise pode ser realizada usando o Toxinômetro® ET-7000.
A quantificação é alcançada através do monitoramento da formação de melanina medindo o tempo de ativação (Ta ou tempo de início) da reação, ou seja, o ponto no tempo em que a absorbância atinge um limiar predeterminado. Ao correlacionar o valor medido a uma curva de calibração gerada anteriormente com um padrão PG, a concentração absoluta de PG e BDG pode ser determinada com uma sensibilidade na faixa inferior pg/ml .
