Kit de détection des pyrogènes LumiMAT™

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Ce kit est conçu pour le Test d'Activation des Monocytes (MAT) afin de détecter les pyrogènes. Le terme "pyrogène" désigne de manière générale les substances qui induisent une augmentation de la température corporelle chez les animaux. Les médicaments administrés par voie parentérale et les dispositifs médicaux en contact avec le sang doivent être exempts de pyrogènes. Le premier test développé pour détecter une large gamme de pyrogènes est le Test Pyrogène sur Lapin (RPT). Dans ce test, les échantillons à tester sont administrés par voie intraveineuse à des lapins, et leur température corporelle est surveillée. En raison des problèmes de reproductibilité, de précision et de coût associés au RPT, le réactif LAL (Limulus Amebocyte Lysate) a été largement adopté comme alternative. Cependant, le réactif LAL ne peut pas détecter les pyrogènes non endotoxiniques, et le RPT est encore utilisé lorsque le réactif LAL n'est pas adéquat.

Le MAT est un test pyrogène in vitro développé comme alternative au RPT, capable de détecter à la fois les endotoxines et les pyrogènes non endotoxiniques.

CARACTÉRISTIQUES PRINCIPALES

• Test utilisant les cellules NOMO-1 rapporteurs
• Tests de dépistage rapide (5 heures)
• Test de rapporteur pratique
• Ajoutez le substrat luminescent à la plaque uniquement après l'incubation
• Lignée cellulaire rapporteuse stable
• Lignées cellulaires exprimant de manière stable des gènes rapporteurs
• Reproductibilité élevée avec moins de variations entre les lots
• Approvisionnement stable à partir d'une banque de cellules maîtresses

CONTENU DU KIT

* Le Kit de détection des pyrogènes LumiMAT™ - Cellules et le Kit de réactifs sont tous deux indispensables pour l'analyse.

PRINCIPE DU TEST

Le MAT est utilisé pour détecter les pyrogènes capables d'activer les cellules monocytaires humaines, entraînant la libération de cytokines inflammatoires.

MAT conventionnel

Les PBMC (cellules mononucléaires du sang périphérique) et les échantillons à analyser sont cultivés dans une plaque à micropuits. Les cytokines sécrétées par les cellules monocytaires en réponse aux pyrogènes sont ensuite quantifiées par ELISA pour identifier les pyrogènes présents dans les échantillons.

LumiMAT™

LumiMAT™ utilise une lignée cellulaire monocytaire NOMO-1, dans laquelle un gène rapporteur de la luciférase a été introduit pour produire la protéine luciférase en réponse aux signaux NF-kB activés par l'exposition aux pyrogènes. La luciférase générée émet une luminescence lorsqu'elle réagit avec le substrat, permettant ainsi de détecter les pyrogènes dans les échantillons à l'aide d'un lecteur de microplaques à luminescence.

FLUX DE L'ESSAI

Ajoutez les échantillons à tester ou l'endotoxine standard dans la microplaque, puis incorporez les cellules rapporteuses et incubez pendant 3 heures. Après l'incubation, ajoutez le substrat luminescent et mesurez la luminescence à l'aide d'un lecteur de plaque. Contrairement à l'ELISA, ce test se fait en une seule plaque, ce qui minimise les variations entre les tests. De plus, les résultats sont disponibles en environ 5 heures, soit considérablement plus rapide que les 1,5 jours requis par la méthode conventionnelle.